Svih 19 klubova koji su dobili licencu za nastup u Prvoj HNL pismeno su se prijavili za natjecanje u prvenstvu 2009./2010., objavljeno je na stranicama Udruge prvoligaša.
Na temelju dopisa Natjecateljske komisije Hrvatskog nogometnog saveza od 2. lipnja 2008., a prema odluci Izvršnog odbora HNS-a, klubovi su danas do 10 sati trebali dostaviti pismenu prijavu i potvrdu o svojem sudjelovanju u Prvoj HNL. Slanjem pismenih potvrda uklonjena je i posljednja zapreka za start proširenog prvoligaškog izdanja sa 16 klubova.
Status prvoligaša, osim 12 dosadašnjih članova Prve HNL, potvrdila su četiri kluba koja su prije posljednjega kola ostvarila plasman na prva četiri mjesta na ljestvici Druge HNL. To su Karlovac, Istra 1961 iz Pule, Slavonac CO iz Starih Perkovaca i Lokomotiva iz Zagreb.
Posljednje kolo Druge lige riješit će pitanje petog mjesta za koje se bore Međimurje, Hrvatski dragovoljac i Solin. Petoplasirana momčad igrat će kvalifikacije za Prvu HNL protiv Croatije Sesveta 7. i 11. lipnja.
Zanimljivo je da nijedan od četiri nova prvoligaša od Odjela za licenciranje nije dobio licencu za svoje stadione za Prvu HNL. Karlovac će tako kao domaćin igrati u Zaprešiću (ŠRC Zaprešić), Istra 1961 u Rijeci (stadion Kantrida), Slavonac CO u Vinkovcima (stadion NK Cibalia) i Lokomotiva (stadion u Maksimiru).
Početak novog prvenstva Prve HNL predviđen je za 25. srpnja.